Bilgi

Kısıtlama Enzimleri: Moleküler Makas

Kısıtlama Enzimleri: Moleküler Makas


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

1970'lerden itibaren DNA molekülünü kısıtlayıcı enzim izolasyonu ile analiz etmek daha kolaydı.

Bu enzimler endonükleazlar, yani içeride (dolayısıyla önek endoDNA molekülleri iyi tanımlanmış yerlere keserek.

Bu enzimler normalde bakteriler tarafından üretilir ve onları istilacı virüslerden koruma özelliğine sahiptir. Bu maddeler DNA molekülünü her zaman belirli noktalarda "dürtür" ve bu da yapışkan ipuçlarıAynı enzimle kesilmiş DNA moleküllerinin diğer uçlarına bağlanabilir.

Genetik Mühendisliği'nde DNA fragmanları elde etmek, in vitro (test tüpünde veya laboratuarda), yeni moleküller, çeşitli bilgileri kesip yapıştırarak.

İzole edilecek ilk kısıtlama enzimlerinden biri EcoRI, bakteri tarafından üretilen Escherichia coli. Bu enzim sadece diziyi tanır GAATTC ve her zaman G ile ilk A arasında hareket eder.

Bir enzimin bölgesi olan "kesim" bölgesi, hedef bölge olarak bilinir. Bu enzimin neden bakterilerin DNA'sına etki etmediğini sorabilirsiniz? Bu, kısıtlama enzimlerinin bakterilerin genetik materyali üzerindeki etkisini önleyen diğer koruyucu enzimlerin varlığından kaynaklanmaz.

kısıtlama enzimleri belirli DNA dizilerini tanır ve bunlara etki ederbelirli bazlara bağlı iki ardışık baz arasındaki bir fosfodiester bağının tahrip edilmesini katalizleyerek. Enzimin kestiği, yani hidrolizi teşvik ettiği nükleotitler, aynı spesifik tanıma dizileri içindedir (resme bakınız).

Her DNA molekülü, GAATTC sekansının tüm uzunluğu boyunca çoklu tekrarlarından oluşabilir. Bu nedenle, EcoRI enzimi ile temas üzerine, DNA ipliği birkaç yerde "kesilebilir" ve farklı boyutlarda birkaç parça üretilebilir.

Aşağıda bu farklı bölünmüş DNA parçalarının nasıl ayrıldığını göreceğiz.